艾滋病,即获得性免疫缺陷综合征(AIDS),其病原体为人类免疫缺陷病毒(HIV),亦称艾滋病病毒。艾滋病的传染源为HIV感染者和AIDS病人。HIV主要存在于传染源的血液、精液、阴道分泌物、胸腹水、脑脊液、羊水和乳汁等体液中。艾滋病主要通过性传播、血液传播、母婴传播。
HIV/AIDS患者的实验室检查方法主要包括HIV抗体检测、HIV-1核酸检测、CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数、HIV-1基因型耐药检测等。
(1)HIV抗体检测:包括HIV抗体筛查试验和HIV抗体确证试验。HIV-1/2抗体筛查方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速检测(免疫层析试验、明胶颗粒凝集试验、免疫渗滤试验)等,一般在发生高危行为2-4周后进行抗体检测。HIV抗体筛查有反应后需要进一步做HIV补充试验,即HIV抗体确证试验(免疫印迹法、条带/线性免疫试验和快速试验)或HIV核酸检测或特定条件下的替代策略。
(2)CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数:目前CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数的方法为两大类:一类是流式细胞仪测定法,另一类是非流式细胞仪测定法。常用的淋巴细胞计数检测方法为自动检测方法,包括流式细胞仪(主要有双平台法和单平台法)和专门的细胞计数仪。
(3)HIV-1核酸检测:HIV-1核酸检测分为定性和定量试验。HIV-1核酸定性检测主要采用实时荧光定量PCR方法,HIV-1核酸定量检测主要基于靶核酸扩增和信号放大两种方法。定性和定量检测均可用作HIV感染诊断,定量检测还可用于抗病毒治疗效果监测。
(4)HIV-1基因型耐药检测:目前我国HIV-1基因型耐药检测采用商品化试剂盒和实验室自建(In-house)两种方法。采用RT-PCR扩增目的基因片段,利用Sanger或深度测序法获得相关基因片段的序列,通过与野生型序列和耐药毒株的信息比较,分析耐药相关基因突变,利用基因型耐药解释系统判断是否耐药以及耐药的程度。
(1)HIV抗体检测:HIV抗体检测是艾滋病最常用的筛查手段,通过检测血液或其他体液中的HIV抗体,来判断体内是否有HIV感染。HIV抗体检测分HIV抗体筛查检测和HIV抗体确证试验,一般先进行HIV抗体筛查检测,若HIV抗体筛查有反应后需要HIV抗体确证或其它补充试验才能确定是否感染HIV。
(2)CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数:A.HIV 感染免疫状态和临床分期;B.疾病进展监测;C.机会性感染的风险评估,辅助判断是否进行预防性治疗);D.抗病毒治疗适应症选择及疗效评价;E.免疫重建监测。
(3)HIV-1核酸检测:核酸检测可用于①HIV感染诊断:A.作为补充试验的意义用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本的判定;B.对近期有明确流行病学史的个体急性期诊断;C.暴露婴儿感染早期诊断。②血液筛查:对献血者及采供血机构的原料血浆进行核酸检测,可及时发现窗口期感染,降低输血的“残余危险度”,减少二代传播。③病程评估及抗病毒治疗效果监测:HIV感染者和艾滋病病人经抗病毒药物治疗后,定期进行HIV-1病毒载量检测,可判断抗病毒药物治疗的疗效。
(3)HIV-1基因型耐药检测:在抗病毒治疗前进行耐药检测,可辅助临床医生制定抗病毒治疗方案,保证抗病毒治疗的效果;抗病毒治疗效果不理想时,进行基因型耐药检测,可辅助临床医生分析治疗失败的原因,并制定补救治疗方案;对人群而言,在开始抗病毒治疗前进行基因型耐药检测,了解从未服用抗病毒药物、曾服用抗病毒药物如暴露前/后预防人群、母婴阻断的母亲等即将开始抗病毒治疗人群的耐药情况,可作为制定一线抗病毒治疗和暴露前/后预防用药方案等的参考依据。在抗病毒治疗12个月或以上的人群中进行基因型耐药检测,了解耐药突变比例和模式,分析耐药发生的影响因素,可作为选择制定二线治疗方案和制定减少耐药发生的措施提供参考依据,指导和完善公共卫生模式抗病毒治疗的程序。
艾滋病,即获得性免疫缺陷综合征(AIDS),其病原体为人类免疫缺陷病毒(HIV),亦称艾滋病病毒。艾滋病的传染源为HIV感染者和AIDS病人。HIV主要存在于传染源的血液、精液、阴道分泌物、胸腹水、脑脊液、羊水和乳汁等体液中。艾滋病主要通过性传播、血液传播、母婴传播。
HIV/AIDS患者的实验室检查方法主要包括HIV抗体检测、HIV-1核酸检测、CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数、HIV-1基因型耐药检测等。
(1)HIV抗体检测:包括HIV抗体筛查试验和HIV抗体确证试验。HIV-1/2抗体筛查方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速检测(免疫层析试验、明胶颗粒凝集试验、免疫渗滤试验)等,一般在发生高危行为2-4周后进行抗体检测。HIV抗体筛查有反应后需要进一步做HIV补充试验,即HIV抗体确证试验(免疫印迹法、条带/线性免疫试验和快速试验)或HIV核酸检测或特定条件下的替代策略。
(2)CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数:目前CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数的方法为两大类:一类是流式细胞仪测定法,另一类是非流式细胞仪测定法。常用的淋巴细胞计数检测方法为自动检测方法,包括流式细胞仪(主要有双平台法和单平台法)和专门的细胞计数仪。
(3)HIV-1核酸检测:HIV-1核酸检测分为定性和定量试验。HIV-1核酸定性检测主要采用实时荧光定量PCR方法,HIV-1核酸定量检测主要基于靶核酸扩增和信号放大两种方法。定性和定量检测均可用作HIV感染诊断,定量检测还可用于抗病毒治疗效果监测。
(4)HIV-1基因型耐药检测:目前我国HIV-1基因型耐药检测采用商品化试剂盒和实验室自建(In-house)两种方法。采用RT-PCR扩增目的基因片段,利用Sanger或深度测序法获得相关基因片段的序列,通过与野生型序列和耐药毒株的信息比较,分析耐药相关基因突变,利用基因型耐药解释系统判断是否耐药以及耐药的程度。
(1)HIV抗体检测:HIV抗体检测是艾滋病最常用的筛查手段,通过检测血液或其他体液中的HIV抗体,来判断体内是否有HIV感染。HIV抗体检测分HIV抗体筛查检测和HIV抗体确证试验,一般先进行HIV抗体筛查检测,若HIV抗体筛查有反应后需要HIV抗体确证或其它补充试验才能确定是否感染HIV。
(2)CD4+T和CD8+T淋巴细胞计数:A.HIV 感染免疫状态和临床分期;B.疾病进展监测;C.机会性感染的风险评估,辅助判断是否进行预防性治疗);D.抗病毒治疗适应症选择及疗效评价;E.免疫重建监测。
(3)HIV-1核酸检测:核酸检测可用于①HIV感染诊断:A.作为补充试验的意义用于筛查试验有反应但抗体确证试验不确定或阴性样本的判定;B.对近期有明确流行病学史的个体急性期诊断;C.暴露婴儿感染早期诊断。②血液筛查:对献血者及采供血机构的原料血浆进行核酸检测,可及时发现窗口期感染,降低输血的“残余危险度”,减少二代传播。③病程评估及抗病毒治疗效果监测:HIV感染者和艾滋病病人经抗病毒药物治疗后,定期进行HIV-1病毒载量检测,可判断抗病毒药物治疗的疗效。
(3)HIV-1基因型耐药检测:在抗病毒治疗前进行耐药检测,可辅助临床医生制定抗病毒治疗方案,保证抗病毒治疗的效果;抗病毒治疗效果不理想时,进行基因型耐药检测,可辅助临床医生分析治疗失败的原因,并制定补救治疗方案;对人群而言,在开始抗病毒治疗前进行基因型耐药检测,了解从未服用抗病毒药物、曾服用抗病毒药物如暴露前/后预防人群、母婴阻断的母亲等即将开始抗病毒治疗人群的耐药情况,可作为制定一线抗病毒治疗和暴露前/后预防用药方案等的参考依据。在抗病毒治疗12个月或以上的人群中进行基因型耐药检测,了解耐药突变比例和模式,分析耐药发生的影响因素,可作为选择制定二线治疗方案和制定减少耐药发生的措施提供参考依据,指导和完善公共卫生模式抗病毒治疗的程序。